一、沙門氏菌的菌株分類與致病特性
沙門氏菌作為一類常見的食源性致病菌,其菌株分類體系明確,不同類別菌株的宿主范圍與致病性差異顯著,這為后續(xù)的疾病防控與檢測方向提供了關(guān)鍵依據(jù)。
從菌株大類劃分,沙門氏菌可分為傷寒型沙門氏菌與非傷寒型沙門氏菌兩大陣營。其中,傷寒型沙門氏菌是引發(fā)人類特定感染性疾病的關(guān)鍵菌株。這類菌株主要針對人類宿主,感染后常導(dǎo)致傷寒、副傷寒等全身性感染疾病,臨床表現(xiàn)為持續(xù)高熱、腹痛、玫瑰疹等,嚴(yán)重時可危及生命,且傳播途徑多與受污染的水源或食物相關(guān)。
而非傷寒型沙門氏菌的分類更為細(xì)致,根據(jù)生物學(xué)特性可進(jìn)一步分為Salmonella enterica(腸沙門氏菌) 和Salmonella bongori(邦戈沙門氏菌) 兩個種。在這兩個種中,對人類健康威脅最大、且造成溫血動物(如豬、牛、雞等家畜家禽)疾病的核心菌株。具有廣泛的宿主適應(yīng)性,可在多種溫血動物體內(nèi)定植、繁殖,進(jìn)而通過動物產(chǎn)品傳播給人類。
從污染與傳播路徑來看,非傷寒型沙門氏菌因廣泛存在于動物界,其污染的食品種類極為多樣,幾乎涵蓋了人類日常飲食中多種高頻動物源性食品。具體包括:畜肉類(如豬肉、牛肉、羊肉等,易在屠宰、分割過程中因接觸動物腸道內(nèi)容物而污染)、禽肉類(如雞肉、鴨肉等,禽類腸道是沙門氏菌的重要定植部位,加工環(huán)節(jié)易造成交叉污染)、鮮蛋類(蛋殼表面易沾染糞便中的沙門氏菌,部分菌株還可穿透蛋殼進(jìn)入蛋黃內(nèi)部)、乳制品(如未經(jīng)巴氏消毒的生牛奶、奶酪等,若奶源被感染奶牛的乳汁污染,易引發(fā)批量中毒)、魚肉煉制品(如魚丸、魚糜等,加工過程中若原料魚攜帶菌株或衛(wèi)生控制不當(dāng),易導(dǎo)致污染擴(kuò)散),以及其他蛋白質(zhì)含量高的食品(如部分豆制品、熟肉制品等,高蛋白環(huán)境利于沙門氏菌繁殖)。人類一旦攝入被這類菌株污染的食品,且未經(jīng)過充分加熱殺滅,就可能引發(fā)沙門氏菌食物中毒,典型癥狀包括惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、發(fā)熱等,嚴(yán)重時可能導(dǎo)致脫水、電解質(zhì)紊亂,對老人、兒童、孕婦及免疫力低下人群威脅更大。
二、沙門氏菌的流行病學(xué)特征
沙門氏菌引發(fā)的食源性疾病在全球范圍內(nèi)均具有較高的發(fā)病率與危害性,不同地區(qū)的流行病學(xué)數(shù)據(jù)雖存在差異,但均凸顯了其對公共衛(wèi)生安全的重要影響。
根據(jù)美國 2011 年針對食源性疾病的權(quán)威統(tǒng)計數(shù)據(jù),在 31 種主要通過食品媒介傳播的疾病病原體中,非傷寒型沙門氏菌展現(xiàn)出了 “高危害” 的流行病學(xué)特征。在致死率方面,非傷寒型沙門氏菌依然占據(jù)首位,每年因該菌感染死亡的人數(shù)約為 378 人,占所有食源性疾病致死人數(shù)的 28%,其致死風(fēng)險顯著高于其他常見食源性病原體。這一數(shù)據(jù)充分說明,盡管非傷寒型沙門氏菌的感染頻率并非最高,但其引發(fā)的疾病癥狀更嚴(yán)重、并發(fā)癥風(fēng)險更高,對公共衛(wèi)生系統(tǒng)的負(fù)擔(dān)與人類生命健康的威脅更為突出。由此可見沙門氏菌檢測是極其重要的,尤其是食品行業(yè)從業(yè)者。
三、新型沙門氏菌檢測產(chǎn)品 “沙增管” 與 “沙測管” 的技術(shù)特點(diǎn)與應(yīng)用流程
針對傳統(tǒng)沙門氏菌檢測方法在檢驗(yàn)應(yīng)用中的局限性,啟新生物科技有限公司開發(fā)了 “沙增管” 與 “沙測管” 組合檢測產(chǎn)品,該產(chǎn)品以 “簡便化、高通量、快速化” 為核心優(yōu)勢,專門適配健康體檢、檢驗(yàn)室人力、物力有限的實(shí)際場景,可高效完成沙門氏菌的初步篩檢工作。
(一)產(chǎn)品核心構(gòu)成與設(shè)計原理
“沙增管” 與 “沙測管” 的核心設(shè)計圍繞 “特異性增菌 +顯色確認(rèn)” 展開,其構(gòu)成與原理具有明確的功能指向性:
核心組件:每套產(chǎn)品包含 “沙增管”“沙測管” 各 1 支,以及 1 支用于采集檢體的無菌棉拭。其中,沙增管內(nèi)預(yù)裝了特異性沙門氏菌增菌固態(tài)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基的配方經(jīng)過優(yōu)化,可選擇性促進(jìn)沙門氏菌的生長繁殖,同時抑制其他雜菌(如變形桿菌、檸檬酸菌等)的生長,沙測管內(nèi)培養(yǎng)基培養(yǎng)后,呈現(xiàn)特定顏色(黑色),實(shí)現(xiàn)對沙門氏菌的初步篩選。
設(shè)計優(yōu)勢:抑制雜菌,顯色初篩!固態(tài)培養(yǎng)基的形態(tài)既便于棉拭充分接觸、吸附菌株,又能避免運(yùn)輸過程中培養(yǎng)基泄漏;無菌棉拭的配套則簡化了檢體采集流程,減少了外部污染風(fēng)險,整體設(shè)計符合體檢場景要求“現(xiàn)場采樣 + 實(shí)驗(yàn)室檢測” 的實(shí)際操作需求。
(二)詳細(xì)操作流程
“沙增管” 與 “沙測管” 的操作流程分為 “檢體采集 - 增菌培養(yǎng) - 顯色確認(rèn) - 后續(xù)分離” 四個步驟,具體操作細(xì)節(jié)如下:
檢體采集階段:打開產(chǎn)品包裝,取出無菌棉拭棒,將棉拭頭輕柔且充分地接觸采樣部位。
增菌培養(yǎng)階段:將采集完檢體的棉拭棒插入 “沙增管” 中,使棉拭頭完全浸沒于固態(tài)培養(yǎng)基內(nèi),然后上下輕輕攪拌 2 次(目的是讓棉拭上吸附的菌株充分釋放到培養(yǎng)基中),攪拌后蓋緊沙增管蓋子(確保密封,防止培養(yǎng)過程中微生物污染或培養(yǎng)基水分流失)。隨后,將沙增管在室溫條件下送至實(shí)驗(yàn)室,放入 35℃的一般培養(yǎng)箱中進(jìn)行增菌培養(yǎng),培養(yǎng)時間為 18~24 小時。這一階段的核心目的是通過特異性培養(yǎng)基的作用,使檢體中可能存在的少量沙門氏菌大量繁殖并抑制雜菌,達(dá)到后續(xù)檢測可識別的濃度。
顯色確認(rèn)階段:增菌培養(yǎng)完成后,取出沙增管中的棉拭棒,將其移插至 “沙測管” 的特殊培養(yǎng)基中,同樣上下輕輕攪拌 2 次(確保增菌后的菌株充分接觸沙測管培養(yǎng)基),攪拌后蓋緊沙測管蓋子,再次放入 35℃的一般培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24~48 小時。培養(yǎng)結(jié)束后觀察沙測管內(nèi)培養(yǎng)基的顏色變化:若培養(yǎng)基呈現(xiàn)黑色,表明檢品中可能含有沙門氏菌(陽性結(jié)果);若培養(yǎng)基未出現(xiàn)黑色,則表明檢品中未檢測到沙門氏菌(陰性結(jié)果)。
后續(xù)分離與鑒定階段:對于顯色確認(rèn)呈陽性的檢品,需進(jìn)一步進(jìn)行菌株分離與鑒定,以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。具體操作為:取出沙測管中的棉拭棒,將其在選擇性培養(yǎng)基(如 XLD 培養(yǎng)基、HE 培養(yǎng)基,或沙門氏菌顯色培養(yǎng)基)表面進(jìn)行劃線接種,然后按照常規(guī)微生物培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng),待形成單菌落后,再通過生化試驗(yàn)、血清型鑒定等傳統(tǒng)方法對菌株進(jìn)行最終確認(rèn),排除假陽性可能,明確是否為沙門氏菌以及具體的血清型別。
“沙增管” 與 “沙測管” 的開發(fā)并非旨在取代傳統(tǒng)檢測方法,而是作為傳統(tǒng)方法的 “前置篩檢工具”,在食品沙門氏菌防控體系中承擔(dān) “快速初篩、批量排查” 的關(guān)鍵角色,其應(yīng)用價值主要體現(xiàn)在以下三點(diǎn):
高通量與高效性:該檢測組合的操作流程簡單(無需復(fù)雜的培養(yǎng)基配制與專業(yè)操作技能)。同時,由于操作簡便,實(shí)驗(yàn)室可同時處理大量檢體(如一次性處理數(shù)十甚至上百支樣品),大幅提升了檢測通量,完美適配檢驗(yàn)室對大批量檢體快速篩查的需求。
高特異性與可靠性:沙增管的特異性增菌培養(yǎng)基可有效抑制雜菌生長,僅促進(jìn)沙門氏菌繁殖,減少了雜菌對后續(xù)檢測的干擾;沙測管的顯色反應(yīng)則基于沙門氏菌的特異性代謝特性,進(jìn)一步確保了檢測結(jié)果的特異性。實(shí)際應(yīng)用中,沙增管經(jīng)過 18~24 小時培養(yǎng)后,可使少量沙門氏菌達(dá)到足夠的檢出濃度,再搭配沙測管的顯色確認(rèn),可有效降低假陽性與假陰性的發(fā)生率,為后續(xù)檢測提供可靠的初篩結(jié)果。試驗(yàn)結(jié)果證明,沙增管+沙測管的組合,體檢應(yīng)用中沙門氏菌的陽性率均能達(dá)到3%以上,遠(yuǎn)高于普通培養(yǎng)法的不足1%陽性率。
“沙增管” 與 “沙測管” 作為新型沙門氏菌篩檢工具,通過 “快速、高通量、高特異性” 的優(yōu)勢,彌補(bǔ)了傳統(tǒng)檢測方法的不足,為健康檢查的沙門氏菌防控提供了高效、便捷的解決方案,在食品從業(yè)人員健康檢測與公共衛(wèi)生安全保障中具有重要的應(yīng)用前景。